Microscopie à fluorescence
Intro Photonique en champ clair Fluorescence Confocale et super résolution Electronique à transmission Electronique à balayage Glossaire
La microscopie en fluorescence (ou épifluorescence) est une technique utilisant un microscope optique tirant profit du phénomène de fluorescence. Un microscope à fluorescence dispose d’une source de lumière spécifique. En plus de la lampe halogène (pour le champ clair), ce microscope est équipé d’une lampe à arc dédiée aux observations en fluorescence. Cette lampe émet des raies lumineuses caractéristiques qui permettent d’exciter les molécules utilisées pour marquer l’échantillon.
Ces molécules, appelées fluorochromes ont la capacité d’absorber de la lumière et de réémettre spontanément à un niveau d’énergie plus faible. Bien que certains composés soient naturellement fluorescents (chlorophylle,…), la plupart des échantillons biologiques doivent subir une préparation particulière qui permettra de rendre fluorescentes une ou plusieurs molécules (par marquages avec des anticorps fluorescents, transfection, …). La technique de marquage sera choisie au cas par cas selon l’échantillon et l’étude à effectuer. La microscopie à fluorescence fait désormais partie des méthodes de recherche classiques et continue à se développer notamment avec les progrès de l’imagerie moléculaire.
Ces molécules, appelées fluorochromes ont la capacité d’absorber de la lumière et de réémettre spontanément à un niveau d’énergie plus faible. Bien que certains composés soient naturellement fluorescents (chlorophylle,…), la plupart des échantillons biologiques doivent subir une préparation particulière qui permettra de rendre fluorescentes une ou plusieurs molécules (par marquages avec des anticorps fluorescents, transfection, …). La technique de marquage sera choisie au cas par cas selon l’échantillon et l’étude à effectuer. La microscopie à fluorescence fait désormais partie des méthodes de recherche classiques et continue à se développer notamment avec les progrès de l’imagerie moléculaire.
(toutes les données sont sous licence Creative Commons BY NC SA, Université de Lille)